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瓊脂糖凝膠電泳時注意事項

瓊脂糖凝膠電泳分子生物學(xué)常用的實驗方法，那么在凝膠電泳過程中需要注意哪些事項呢？一、切膠時的注意事項1.盡量保證電泳的buffer和gel都是新制的，切膠的臺子清理干凈，刀片也要洗凈，確保切下的沒有外源dna污染。2.為了減少膠的體積，可以用相對比較薄的膠來做，只要夠點樣即可，也可采用薄而寬的梳子來跑膠。3.關(guān)于防護，戴一般有機玻璃眼罩就足夠了，戴上防護面具也以保護眼睛，如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者對于膠有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用點marke...

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HEK293細胞的特點與應(yīng)用

HEK293細胞的特點和應(yīng)用人胚腎293(HEK293)細胞是生物技術(shù)和研究中常用的細胞系之一。由于HEK293細胞具有較高的生長效率，通常生成用于生物醫(yī)學(xué)和藥物研究的外源性蛋白質(zhì)。HEK293細胞也會被用于各種轉(zhuǎn)染實驗中。HEK293細胞起源和背景人胚腎293細胞AlexVanderEb在1970年代時培養(yǎng)出了HEK293細胞系。為了產(chǎn)生永生化細胞系，Graham將5型腺病毒的DNA轉(zhuǎn)染到HEK細胞的人類19號染色體中。Ad5整合到細胞基因組中導(dǎo)致細胞凋亡的預(yù)防，從而導(dǎo)致細...

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購買細胞常見問題匯總

購買細胞常見問題匯總購買細胞收到細胞前，應(yīng)做哪些準備工作？購買細胞應(yīng)具有一定細胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗，并具備基本實驗設(shè)備，如細胞培養(yǎng)實驗室、超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡等；還應(yīng)準備好相應(yīng)的細胞無菌培養(yǎng)基、血清、雙抗、細胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、移液管等。購買的細胞收到細胞后，應(yīng)該怎么操作？1.觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與技術(shù)支持聯(lián)系；2.用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落，將細胞置于細胞培...

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降低CHO細胞培養(yǎng)中的乳酸水平的解決方案

乳酸是CHO細胞補料分批培養(yǎng)的主要副產(chǎn)品之一。在pH控制的生物反應(yīng)器中，由于添加堿以控制細胞培養(yǎng)基的pH值，高水平乳酸的積累伴隨著高滲透壓，可能導(dǎo)致制造細胞生長緩慢，甚至大量凋亡，同時產(chǎn)生抗體蛋白的產(chǎn)量也降低不少。而乳酸脫氫酶(LDH)是一種催化底物丙酮酸轉(zhuǎn)化為乳酸的酶，包括丙酮酸濃度在內(nèi)的許多因素都會調(diào)節(jié)LDH活性。乳酸脫氫酶對代謝產(chǎn)物的影響在一項研究中，科學(xué)家們曾嘗試敲低乳酸脫氫酶A(LDHa)和PDHK的基因表達，以研究對乳酸代謝和蛋白質(zhì)生產(chǎn)的影響。他們發(fā)現(xiàn)，使用攜帶L...

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DNA克隆技術(shù)概述

當您聽到“克隆”一詞時，您可能會想到克隆整個生物體，例如綿羊多利。然而，克隆某物的全部意思就是制作它的基因精確副本。在分子生物學(xué)實驗室中，常被克隆的是基因或其他小片段DNA稱為DNA克隆。DNA克隆技術(shù)概述DNA克隆技術(shù)其實就是基因編輯，是指制作特定DNA片段的多個相同副本的過程。在典型的DNA克隆過程中，通常會將目的的基因或其他DNA片段插入稱為質(zhì)粒的環(huán)狀DNA片段中。插入是使用“剪切和粘貼”DNA的酶完成的，它會產(chǎn)生一個重組DNA分子，或由多個來源的片段組裝而成的DNA。...

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