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技術(shù)文章
2023-228
用肉眼或光學(xué)顯微鏡檢測(cè)支原體比較困難,所以支原體檢測(cè)一般會(huì)通過(guò)PCR的檢測(cè)、DNA染色、熒光標(biāo)記、瓊脂平板接種等方法來(lái)實(shí)現(xiàn)。在支原體檢測(cè)之前,細(xì)胞應(yīng)連續(xù)培養(yǎng)至少兩周,以便有時(shí)間讓低水平的污染物生長(zhǎng)。對(duì)于測(cè)試,在取樣前至少兩三天內(nèi)不應(yīng)更換培養(yǎng)基。一、培養(yǎng)法在瓊脂平板/肉湯上培養(yǎng)被認(rèn)為是檢測(cè)支原體的“金標(biāo)準(zhǔn)”。在這種方法中,將細(xì)胞培養(yǎng)物的上清液添加到液體或半固體培養(yǎng)基(含有支原體生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì))中。受感染的細(xì)胞培養(yǎng)物會(huì)在液體肉湯和瓊脂平板上生長(zhǎng)。瓊脂平板上很容易看到支原體菌...
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2023-228
細(xì)胞生物學(xué)研究、創(chuàng)新藥開發(fā)等領(lǐng)域經(jīng)常會(huì)進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng),但是很多實(shí)驗(yàn)員不知道該怎么選購(gòu)細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑,本節(jié)小編帶你初步了解一下細(xì)胞系的選擇技巧、購(gòu)買細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)考慮的因素。一、細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要為細(xì)胞創(chuàng)造良好的細(xì)胞的存活和增殖環(huán)境,這樣的環(huán)境條件包括培養(yǎng)溫度、濕度和CO2水平、營(yíng)養(yǎng)成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...
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2023-228
我們知道開始培養(yǎng)的細(xì)胞不能無(wú)限期地生長(zhǎng),因?yàn)槭芟迏^(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)量不斷增加,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也會(huì)被消耗,從而導(dǎo)致有毒的代謝產(chǎn)物增加,另外根據(jù)實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)需要,也要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。通過(guò)去除培養(yǎng)基并將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基和基質(zhì)中,細(xì)胞獲得了新鮮的營(yíng)養(yǎng)并去除了有毒代謝物,從而可以長(zhǎng)期維持培養(yǎng)。這個(gè)過(guò)程就屬于傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)的細(xì)胞密度會(huì)低于原始培養(yǎng)物中的細(xì)胞密度。當(dāng)接種細(xì)胞后,細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)經(jīng)過(guò)滯后期、對(duì)數(shù)期,穩(wěn)定期和凋亡期。在凋亡期,細(xì)胞會(huì)因缺乏營(yíng)養(yǎng)或培養(yǎng)條件不當(dāng)而死亡。貼壁細(xì)胞傳代培...
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2023-227
過(guò)濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過(guò)濾器的工作原理、維護(hù)級(jí)別以及過(guò)濾器需要多久更換一次,這些都是購(gòu)買生物安全柜時(shí)需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過(guò)濾器有什么區(qū)別呢?生物安全柜中使用的過(guò)濾器,一般為高效微粒空氣(HEPA)過(guò)濾器和超低滲透(ULPA)過(guò)濾器,HEPA和ULPA過(guò)濾器有什么區(qū)別呢?HEPA和ULPA過(guò)濾器的結(jié)構(gòu)及其工作原理從結(jié)構(gòu)和化學(xué)角度來(lái)說(shuō),HEPA和ULPA過(guò)濾器非常相似。這些過(guò)濾器用于生物安全柜,其中氣流(由電機(jī)驅(qū)動(dòng))攜帶有害氣體和顆...
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2023-221
國(guó)產(chǎn)PCR儀購(gòu)買時(shí)的注意事項(xiàng)PCR儀作為分子生物學(xué)相關(guān)實(shí)驗(yàn)的常規(guī)儀器,每年都有數(shù)千臺(tái)的選購(gòu)量,這兩年一批國(guó)產(chǎn)PCR儀正在興起。購(gòu)買國(guó)產(chǎn)PCR儀需要考慮以下因素1樣本管的種類現(xiàn)在主要有0.2ml和0.5ml兩種,使用0.5mlPCR管的人員已經(jīng)很少了,一是0.5mlPCR專用的薄壁管很少見,二是如果想要較大體積的PCR產(chǎn)物,可以通過(guò)多分幾個(gè)0.2mlPCR管來(lái)實(shí)現(xiàn)。除非經(jīng)常需要較大體積的PCR產(chǎn)物,否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀。2樣本容量種類很多,0.2ml的有96孔...
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